माइक्रोप्लेट रीडर के लिए इम्यूनोएसे डेटा की पुनरावृत्ति और प्रयोगात्मक गुणवत्ता नियंत्रण के लिए संपूर्ण गाइड

माइक्रोप्लेट रीडर के लिए प्रतिरक्षा परीक्षण डेटा दोहराव और प्रयोगात्मक गुणवत्ता नियंत्रण के लिए पूर्ण गाइड

I. प्रयोगशाला डेटा की विश्वसनीयता के लिए ELISA परीक्षणों की दोहरावशीलता एक मुख्य चुनौती क्यों बन गई है

1.1 झूठे नकारात्मक परिणाम से उत्पन्न होने वाला पता लगाने का संकट

एक खाद्य सुरक्षा नमूना निरीक्षण के दौरान, एक तीसरे पक्ष के परीक्षण एजेंसी ने एक ही सब्जी के नमूने पर कीटनाशक अवशेषों का पता लगाने के लिए एक ELISA परीक्षण किया। प्रारंभिक परिणाम नकारात्मक (अनुपालन) था,जबकि पुनः परीक्षण ने सकारात्मक परिणाम दिया (अनुमेय सीमा से अधिक)दोनों परीक्षणों में अभिकर्मकों के एक ही बैच, एक ही ऑपरेटर और एक ही माइक्रोप्लेट रीडर का उपयोग किया गया; फिर भी परिणाम पूरी तरह से विरोधाभासी थे। आगे की जांच पर,समस्या माइक्रोप्लेट रीडर पढ़ने की प्रक्रिया के दौरान उत्पन्न होने के रूप में पहचाना गया: प्रारंभिक परीक्षण के दौरान, माइक्रोप्लेट को पर्याप्त रूप से स्थिर नहीं रहने दिया गया था, जिससे कुओं में छोटे हवा के बुलबुले रह गए थे,जिसके कारण अवशोषण की कम गणना हुई और गलत नकारात्मक परिणाम मिला।.

यह एक अलग मामला नहीं है। इसकी उच्च संवेदनशीलता, मजबूत विशिष्टता और उपयोगकर्ता के अनुकूल संचालन के कारण, एलिसा परीक्षणों को नैदानिक निदान, खाद्य सुरक्षा,पर्यावरणीय निगरानीहालांकि, एलिसा प्रक्रियाओं में कई कदम और जटिल प्रभावकारी कारक शामिल हैं; किसी भी चरण में कोई विचलन, कोटिंग, ब्लॉक, नमूना जोड़ने से लेकर,और प्रजनन से लेकर धोने तक, रंग विकास, समाप्ति, और पढ़ने के लिए असामान्य परिणाम का कारण बन सकता है। इन सभी प्रभावकारी कारकों में से, the accuracy and stability of the enzyme-linked immunosorbent assay reader's readings represent the final safeguard for ensuring the reliability of the final data—and yet this step is often the most easily overlooked.

एक गलत अवशोषण रीडिंग सकारात्मक नमूना की झूठी नकारात्मक व्याख्या या नकारात्मक नमूना की झूठी सकारात्मक व्याख्या का कारण बन सकती है।झूठी नकारात्मकता उचित उपचार में देरी कर सकती है, जबकि झूठी सकारात्मकता के परिणामस्वरूप अनावश्यक चिकित्सा हस्तक्षेप हो सकते हैं; खाद्य सुरक्षा परीक्षणों में, झूठी नकारात्मकता से निम्न गुणवत्ता वाले उत्पादों को बाजार में प्रवेश करने की अनुमति मिल सकती है,जबकि झूठी सकारात्मक सूचनाओं से व्यवसायों को अनुचित वित्तीय हानि हो सकती है।एलिसा परीक्षण के परिणामों की पुनरावृत्ति और विश्वसनीयता पहले से कहीं अधिक महत्वपूर्ण है।

1.2 एलिसा परीक्षण डेटा की विश्वसनीयता का आकलन करने के लिए चार मुख्य तत्व

एलिसा परीक्षण के परिणामों की सटीकता और पुनः प्रयोज्यता चार प्रमुख मूल तत्वों के सामंजस्यपूर्ण नियंत्रण पर निर्भर करती हैः

• अभिकर्मक पर विचारः एंटीबॉडी/एंटीजन की गुणवत्ता और टाइटर, एंजाइम संयुग्मन की गतिविधि, सब्सट्रेट की ताजगी,और संदर्भ सामग्री की सटीकता विश्वसनीय परीक्षण परिणामों के लिए आधार हैअभिकर्मक बैचों के बीच भिन्नता, अनुचित भंडारण, या समाप्त या विफल अभिकर्मक सभी परिणाम विचलन का कारण बन सकते हैं।
• परिचालन कारक: नमूना जोड़ने की सटीकता और स्थिरता, ऊष्मायन तापमान और अवधि का सटीक नियंत्रण, धोने की पर्याप्तता,और रंग विकास के समय का उचित प्रबंधन प्रयोगात्मक पुनरुत्पादकता सुनिश्चित करने के लिए महत्वपूर्ण हैंमैन्युअल संचालन में भिन्नताएं बैच से बैच और कुएं से कुएं में भिन्नता के प्राथमिक स्रोत हैं।
• उपकरणिक विचार: ऑप्टिकल पथ स्थिरता, तरंग दैर्ध्य सटीकता, रीडिंग दोहराव,और माइक्रोप्लेट रीडर के प्लेट हिला समारोह अंतिम डेटा की सटीकता सुनिश्चित करने के लिए महत्वपूर्ण हैंयदि उपकरण का प्रदर्शन अनुकूलतम नहीं है या उसकी स्थिति खराब है, तो सभी पिछले प्रयास व्यर्थ हो सकते हैं।
• पर्यावरणीय कारक: प्रयोगशाला का तापमान, आर्द्रता, प्रकाश के संपर्क और कंपन बाहरी परिस्थितियां हैं जो प्रयोग की स्थिरता को प्रभावित करती हैं।पर्यावरणीय उतार-चढ़ाव अभिकर्मकों की गतिविधि और प्रतिक्रिया दर को प्रभावित कर सकते हैं, जिससे परिणाम बहने लगता है।

MY-628 मल्टीफंक्शनल ELISA विश्लेषक में आयातित हैलोजन प्रकाश स्रोत, 8-चैनल ऊर्ध्वाधर ऑप्टिकल पथ प्रणाली, उच्च परिशुद्धता फिल्टर और विशेष विश्लेषणात्मक सॉफ्टवेयर है,एलिसा परीक्षण डेटा की सटीकता और पुनः प्रयोज्यता के लिए उपकरण स्तर पर ठोस आश्वासन प्रदान करनामानक प्रयोगशाला प्रक्रियाओं और गुणवत्ता नियंत्रण प्रबंधन के साथ संयुक्त होने पर,यह उपकरण प्रयोगशालाओं को "बैच-टू-बैच परिवर्तनशीलता" की चुनौती से उबरने और एक विश्वसनीय प्रतिरक्षा परीक्षण डेटा प्रणाली स्थापित करने में मदद करता है.

II. मुख्य तकनीकी विनिर्देश और गुणवत्ता नियंत्रण क्षमता मैट्रिक्स

III. आठ चरणों की मानकीकृत ELISA पहचान और रीडिंग प्रक्रिया

चरण 1: प्रयोगात्मक तैयारी और अभिकर्मक संतुलन

1. किट को 30 मिनट पहले रेफ्रिजरेटर से निकालें और इसे कमरे के तापमान पर संतुलित होने दें ताकि अभिकर्मक का तापमान प्रयोगशाला के तापमान से मेल खाए।
2. अभिकर्मकों की समाप्ति तिथि की जाँच करें और पुष्टि करें कि सभी घटक ऎसे एंजाइम संयुग्मित, सब्सट्रेट, और समाप्त समाधान ऎसे सभी घटक ऎसी अच्छी स्थिति में हैं।
3. सफाई समाधान तैयार करें; निर्देशों के अनुसार केंद्रित सफाई समाधान को पतला करें।
4. आवश्यक उपभोग्य सामग्रियां तैयार करें: पाइपेट, टिप्स, 96-कूप प्लेट, टाइमर आदि।
5. प्रकाश स्रोत और ऑप्टिकल पथ प्रणाली को स्थिर करने के लिए माइक्रोप्लेट रीडर को चालू करें और इसे 15-30 मिनट के लिए प्रीहीट करने दें।

गुणवत्ता नियंत्रण के मुख्य बिंदुः अभिकर्मकों को पूरी तरह संतुलित करने में विफलता असंगत प्रतिक्रिया दरों का कारण बन सकती है, जो बैच से बैच में भिन्नता का एक सामान्य कारण है।एलिसा रीडर का अपर्याप्त प्रीहीटिंग प्रारंभिक रीडिंग विचलन का कारण बन सकता है, जिससे माप की सटीकता प्रभावित होती है।

चरण 2: एलिसा रीडर की स्वतः जांच और प्रदर्शन सत्यापन

1. माइक्रोप्लेट रीडर को चालू करें और उपकरण के स्वयं परीक्षण को पूरा करने की प्रतीक्षा करें।
2. प्रकाश स्रोत की स्थिति की जाँच करें और पुष्टि करें कि हलोजन दीपक ठीक से काम कर रहा है।
3. एक रिक्त प्लेट या एक कैलिब्रेशन प्लेट का उपयोग करके एक अंतरिम सत्यापन करें ताकि यह पुष्टि हो सके कि रीडिंग सामान्य सीमा के भीतर हैं।
4. जांचें कि फ़िल्टर व्हील सुचारू रूप से घूमता है और कि तरंग दैर्ध्य स्विचिंग सही ढंग से काम करता है या नहीं।
5. जांचें कि टचस्क्रीन और सॉफ्टवेयर सामान्य रूप से काम कर रहे हैं, कोई त्रुटि संदेश प्रदर्शित नहीं किया गया है।

गुणवत्ता नियंत्रण का मुख्य बिंदुः प्रत्येक प्रणाली प्रारंभ पर प्रदर्शन सत्यापन करें; यह डेटा की सटीकता सुनिश्चित करने के लिए एक पूर्व शर्त है।यह अनुशंसा की जाती है कि सप्ताह में एक बार एक मानक अवशोषण संदर्भ प्लेट का उपयोग करके एक व्यापक आवधिक सत्यापन किया जाए.

चरण 3: नमूना जोड़ना और ऊष्मायन

1. प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल के अनुसार प्लेट को व्यवस्थित करेंः खाली कुएं, मानक कुएं, नियंत्रण कुएं और नमूना कुएं।
2. कोटिंग एंटीबॉडी या एंटीजन (उदाहरण के लिए, बिना कोटिंग प्लेट का उपयोग करते समय) को सटीक रूप से जोड़ें।
3. मानक, नियंत्रण नमूना और परीक्षण नमूना क्रम में जोड़ें; सुनिश्चित करें कि प्रत्येक कुएं में जोड़ा गया मात्रा सुसंगत है।
4. एंजाइम संयुग्मित जोड़ें और अच्छी तरह से मिश्रण करने के लिए धीरे-धीरे हिलाएं।
5. सीलिंग फिल्म लगाएं और नमूने को 37 डिग्री सेल्सियस की इनक्यूबेटर में निर्दिष्ट इनक्यूबेशन समय के लिए रखें।

गुणवत्ता नियंत्रण के मुख्य बिंदुः नमूना जोड़ना ELISA प्रक्रियाओं में त्रुटि के लिए सबसे बड़ी संभावना वाला कदम है। क्रॉस-कंटॉमिनेशन को रोकने के लिए कैलिब्रेटेड पाइपेट का उपयोग करें और पाइपेट टिप्स को बदलें।पहले भरे हुए कुओं में लंबे समय तक प्रतिक्रिया समय से बचने के लिए एक सुसंगत नमूना जोड़ने की गति बनाए रखें.

चरण 4: पकवान धोना

1. इनक्यूबेशन पूरा होने के बाद, कुओं से तरल निकालें।
2. वाशिंग सॉल्यूशन डालें, इसे 30 से 60 सेकंड के लिए खड़े होने दें, फिर फेंक दें।
3. धोने को 3 से 5 बार दोहराएं (इंस्ट्रक्शन मैनुअल के अनुसार)
4. अंतिम धोने के बाद, छिद्रों में कोई अवशिष्ट तरल न बने यह सुनिश्चित करने के लिए नमूना को अवशोषक कागज पर सूखें।

गुणवत्ता नियंत्रण के मुख्य बिंदुः अपर्याप्त धुलाई से गैर-विशिष्ट बंधन में वृद्धि, उच्च पृष्ठभूमि स्तर और उच्च परीक्षण परिणाम हो सकते हैं।अत्यधिक धोने से विशिष्ट बंधन का अवशोषण हो सकता हैसूखने के दौरान कुएं के तल को खरोंचने से बचें।

चरण 5: रंग विकास प्रतिक्रिया

1. प्रत्येक कुएं में सब्सट्रेट समाधान (जैसे टीएमबी) जोड़ें; मात्रा और जोड़ने का क्रम नमूना लोड करने के लिए उपयोग किए जाने वाले के अनुरूप होना चाहिए।
2. मिश्रण के लिए धीरे-धीरे हिलाएं; माइक्रोप्लेट रीडर पर प्लेट हिलाएं (कम गति, कम अवधि) का उपयोग किया जा सकता है।
3. अंधेरे में उगाना; निर्दिष्ट समय के लिए रंग विकसित करना (आमतौर पर 10-15 मिनट) ।
4. रंग विकास का निरीक्षण करें: सकारात्मक कुओं को एक स्पष्ट नीला रंग दिखाना चाहिए।

गुणवत्ता नियंत्रण का मुख्य बिंदुः रंग विकास का समय परिणामों पर महत्वपूर्ण प्रभाव डालता है और इसे सख्ती से नियंत्रित किया जाना चाहिए।यह एक टाइमर का उपयोग करने के लिए सिफारिश की है पहली सब्सट्रेट अच्छी तरह से जोड़ा जाता है के क्षण से शुरू टाइमिंग, और समय अंतराल समाप्त होने पर तुरंत स्टॉप सॉल्यूशन जोड़ें।

चरण 6: प्रतिक्रिया समाप्त करें और एक यांत्रिक शेकर का उपयोग करके अच्छी तरह से मिश्रण करें।

1. समाप्त समाधान (जैसे, 2 M H2SO4) को उसी क्रम में प्रत्येक कुएं में जोड़ा जाता है जिसमें सब्सट्रेट जोड़ा गया था।
2. समापन समाधान जोड़ने के बाद, रंग नीले से पीले रंग में बदल जाता है (TMB प्रणाली) ।
3. प्रत्येक कुएं में तरल पदार्थ के गहन मिश्रण को सुनिश्चित करने के लिए उपयुक्त गति और समय (आमतौर पर मध्यम गति, 10 ¢ 30 सेकंड) का चयन करने के लिए माइक्रोप्लेट रीडर पर प्लेट शेकिंग फ़ंक्शन का उपयोग करें।
4. मिश्रण को 1-2 मिनट के लिए खड़े रहने दें; एक बार बुलबुले गायब हो जाने के बाद, रीडिंग लेने के लिए तैयार रहें।

गुणवत्ता नियंत्रण के लिए महत्वपूर्ण बिंदुः समापन समाधान का जोड़ अनुक्रम और अंतराल सब्सट्रेट के लिए उपयोग किए जाने वाले से मेल खाना चाहिए,यह सुनिश्चित करना कि सभी कुओं में रंग विकास का समय समान होप्लेट को हिलाए जाने के बाद, इसे डिफ्यूमिंग के लिए खड़ा होने दिया जाना चाहिए; बुलबुले अवशोषण रीडिंग में गंभीर रूप से हस्तक्षेप कर सकते हैं, जिससे परिणाम कम हो सकते हैं।

चरण 7: अवशोषण की मात्रा

1. यह सुनिश्चित करने के लिए माइक्रोप्लेट का निरीक्षण करें कि कोई बुलबुले, कोई तरल लीक या कुओं के बाहर कोई तरल नहीं है।
2. माइक्रोप्लेट को माइक्रोप्लेट रीडर के लिए माइक्रोप्लेट धारक में सही ढंग से रखें, ओरिएंटेशन (ए1 कुएं की स्थिति) पर ध्यान दें।
3. टचस्क्रीन पर उपयुक्त डिटेक्शन प्रोग्राम चुनें और सत्यापित करें कि तरंग दैर्ध्य सेटिंग्स सही हैं (मुख्य तरंग दैर्ध्य + संदर्भ तरंग दैर्ध्य) ।
4. सत्यापित करें कि बोर्ड लेआउट विन्यास वास्तविक बोर्ड लेआउट से मेल खाता है।
5. आरंभिक रीडिंगः उपकरण स्वचालित रूप से पूर्ण प्लेट अवशोषण माप करता है।
6. पढ़ने के पूरा होने पर, किसी भी असामान्य मान (जैसे बुलबुले के कारण असामान्य रूप से कम मान) की जांच के लिए कच्चे डेटा की समीक्षा करें।

गुणवत्ता नियंत्रण का महत्वपूर्ण बिंदुः आगे रंग परिवर्तनों को रोकने के लिए प्रक्रिया समाप्त होने के बाद 5 मिनट के भीतर रीडिंग ली जानी चाहिए।630 एनएम) कुएं के तल पर खरोंच या धब्बे के कारण होने वाले हस्तक्षेप को समाप्त कर सकता हैअसामान्य रीडिंग दिखाने वाले किसी भी कुएं को चिह्नित या फिर से मापा जाना चाहिए।

चरण 8: डेटा प्रोसेसिंग और परिणाम समीक्षा

1. सॉफ्टवेयर स्वचालित रूप से रिक्त औसत, मानक वक्र और नमूना सांद्रता की गणना करता है।
2. मानक वक्र सत्यापनः सहसंबंध गुणांक R2 ≥ 0.99 होना चाहिए (या किट विनिर्देशों के अनुरूप होना चाहिए); गणना की गई एकाग्रता विचलन स्वीकार्य सीमा के भीतर होना चाहिए।
3. गुणवत्ता नियंत्रण नमूनों का ऑडिटः गुणवत्ता नियंत्रण नमूनों का मापा गया मूल्य लक्ष्य मूल्य के ±2 एसडी के दायरे में होना चाहिए।कम से कम दो स्तर गुणवत्ता नियंत्रण नमूनों को एक साथ नियंत्रित किया जाना चाहिए.
4. नमूने के परिणामों की समीक्षा करें: मानक वक्र सीमा से बाहर के किसी भी नमूने की जांच करें (ये पतला और पुनः विश्लेषण किया जाना चाहिए) ।
5. परिणाम की वैधता का सत्यापनः मानक वक्र और गुणवत्ता नियंत्रण परीक्षण दोनों आवश्यकताओं को पूरा करते हैं; इस बैच के लिए परिणाम मान्य हैं।
6. डेटा सहेजें, रिपोर्ट प्रिंट करें, साइन करें और संग्रह करें

गुणवत्ता नियंत्रण के मुख्य बिंदुः परीक्षणों के प्रत्येक बैच में गुणवत्ता नियंत्रण के नमूने शामिल होने चाहिए; यदि गुणवत्ता नियंत्रण के परिणाम आवश्यकताओं को पूरा नहीं करते हैं,परिणामों के पूरे बैच को अमान्य माना जाएगा और इसकी सूचना नहीं दी जा सकती है।मानक वक्र फिटिंग विधि का चयन परीक्षण की विशेषताओं के आधार पर किया जाना चाहिए; सभी परीक्षण रैखिक प्रतिगमन के लिए उपयुक्त नहीं हैं।

IV. अवशोषण माप की सटीकता को प्रभावित करने वाले सात मुख्य कारक

1प्रकाश स्रोत की स्थिरता और जीवन काल

हेलोजन लैंप की प्रकाश तीव्रता समय के साथ धीरे-धीरे घट जाती है और वोल्टेज में उतार-चढ़ाव से प्रकाश तीव्रता में भी भिन्नता आ सकती है।प्रकाश स्रोत की यह अस्थिरता सीधे अवशोषण माप में बहाव की ओर ले जाती है और बैच से बैच में भिन्नता का एक महत्वपूर्ण स्रोत है।.

प्रभाव स्तरः प्रकाश स्रोत की उम्र बढ़ने से 5%~15% की रीडिंग विचलन हो सकती है।

नियंत्रण उपायः स्थिर प्रकाश तीव्रता सुनिश्चित करने के लिए उच्च गुणवत्ता वाले आयातित हलोजन दीपक का प्रयोग करें; प्रत्येक उपयोग से पहले 15-30 मिनट के लिए डिवाइस को पूर्व-गर्म करें;प्रकाश स्रोत स्थिर होने के बाद ही माप करेंआवधिक रूप से एक मानक अवशोषण संदर्भ प्लेट का उपयोग करके प्रणाली की जांच करें; सेवा जीवन समाप्त होने पर प्रकाश स्रोत को तुरंत बदलें।

2ऑप्टिकल पथ स्थिरता और अंतर-विद्यार्थी परिवर्तन

एक बहु-चैनल माइक्रोप्लेट रीडर में प्रत्येक चैनल के ऑप्टिकल पथ की विशेषताएं पूरी तरह से समान नहीं हो सकती हैं; यदि ऑप्टिकल पथ डिजाइन अपर्याप्त है,यह विभिन्न कुओं में एक ही समाधान के लिए अलग-अलग रीडिंग का परिणाम हो सकता हैएक आठ-चैनल ऊर्ध्वाधर ऑप्टिकल पथ डिजाइन सभी कुओं में ऑप्टिकल पथों की स्थिरता को अधिकतम करता है।

प्रभाव स्तरः ऑप्टिकल पथ में भिन्नता के कारण छेद के बीच CV 1% से अधिक हो सकता है।

नियंत्रण के उपाय: ऊर्ध्वाधर ऑप्टिकल पथ डिजाइन के साथ एक ELISA रीडर का प्रयोग करें; नियमित रूप से इन-वेल स्थिरता परीक्षण करें; महत्वपूर्ण प्रयोगों के लिए,इनट्रा-वेल प्रतिकृतियां करें और औसत मूल्य की गणना करें; कुएं के तल की स्थितियों में भिन्नता के लिए सुधार के लिए संदर्भ तरंग दैर्ध्य का उपयोग करें।

3फ़िल्टर तरंग दैर्ध्य सटीकता

फ़िल्टर की मध्य तरंग दैर्ध्य और आधा चौड़ाई सीधे पता लगाने की विशिष्टता और संवेदनशीलता को प्रभावित करती है।तरंग दैर्ध्य विचलन के कारण अवशोषण रीडिंग वास्तविक मूल्य से विचलित हो सकता हैविभिन्न रिएजेंट के बैचों के लिए इष्टतम तरंग दैर्ध्य थोड़ा भिन्न हो सकता है।

प्रभाव स्तरः 5 एनएम की तरंग दैर्ध्य परिवर्तन 3%~10% की रीडिंग विचलन का कारण बन सकता है।

नियंत्रण उपाय: उच्च गुणवत्ता वाले हस्तक्षेप फिल्टर का प्रयोग करें; नियमित तरंग दैर्ध्य कैलिब्रेशन करें; अभिकर्मक निर्देशों के अनुसार सही तरंग दैर्ध्य का चयन करें;मानक विन्यास 405/450/492/630 एनएम की तरंग दैर्ध्य के साथ मुख्यधारा के रंगमिति प्रणालियों को कवर करता हैविशेष अनुप्रयोगों के लिए, उपयुक्त अतिरिक्त फिल्टर चुनें।

4माइक्रोप्लेट की गुणवत्ता और अच्छी तरह से नीचे की स्थिति

माइक्रोप्लेट उत्पादों के विभिन्न ब्रांडों और बैचों में प्रकाश पारगम्यता के स्तर भिन्न हो सकते हैं। खरोंच, फिंगरप्रिंट, दाग,या कुएं के तल पर तरल अवशेष प्रकाश संचरण को बाधित कर सकते हैं, जिसके परिणामस्वरूप असामान्य रीडिंग मान होते हैं। कुओं के किनारों पर वाष्पीकरण प्रभाव (एज इफेक्ट) भी प्रयोगात्मक परिणामों को प्रभावित कर सकता है।

प्रभाव स्तरः बोर्डों के बीच भिन्नता 5% से 10% तक हो सकती है; दूषित छेद असामान्य रूप से उच्च रीडिंग का कारण बन सकते हैं।

नियंत्रण उपायः उच्च गुणवत्ता वाली, उच्च पारदर्शी ELISA प्लेटों का प्रयोग करें; प्रत्येक प्रयोग के लिए एक ही बैच की प्लेटों का उपयोग करें; ऑपरेशन के दौरान कुएं के तल को छूने से बचें;पढ़ने से पहले अच्छी तरह से नीचे की जाँच करें और साफजब महत्वपूर्ण किनारे प्रभाव मौजूद हों, तो किनारे के कुओं का उपयोग करने से बचें या आर्द्रता उपचार लागू करें।

5बुलबुला और तरल समरूपता

नमूना जोड़ने या प्लेट हिलाते समय उत्पन्न होने वाले बुलबुले अवशोषण माप में गंभीर रूप से हस्तक्षेप कर सकते हैं; चूंकि प्रकाश इन बुलबुले के माध्यम से सामान्य रूप से नहीं गुजर सकता है,इससे असामान्य रूप से कम रीडिंग होती हैअसमान तरल मिश्रण से एक ही कुएं के भीतर असमान एकाग्रता वितरण हो सकता है।

प्रभावः बुलबुले से एकल छेद की रीडिंग 20% से अधिक कम हो सकती है या झूठे नकारात्मक परिणाम भी हो सकते हैं।

नियंत्रण के उपाय: नमूना जोड़ने के दौरान बुलबुले बनने से बचें; बुलबुले बनने का कारण बन सकता है कि तेज हिला को रोकने के लिए एक उपयुक्त हिलने की गति बनाए रखें;बुलबुले को खत्म करने के लिए माप को पढ़ने से पहले मिश्रण को 1-2 मिनट के लिए खड़े होने देंयदि बुलबुले पाए जाते हैं, तो उन्हें सुई या केन्द्रापसारक का उपयोग करके निकालें; असामान्य रूप से कम रीडिंग वाले कुओं के लिए, बुलबुले की उपस्थिति की जांच करें।

6परिवेश का तापमान और आर्द्रता

परिवेश का तापमान अभिकर्मकों की प्रतिक्रिया दर और एंजाइम गतिविधि, साथ ही इलेक्ट्रॉनिक घटकों की स्थिरता दोनों को प्रभावित करता है। अत्यधिक आर्द्रता ऑप्टिकल लेंस पर संघनक का कारण बन सकती है,ऑप्टिकल पथ को बाधित करनाइसके विपरीत, अपर्याप्त आर्द्रता स्थिर विद्युत उत्पन्न कर सकती है, जिससे उपकरण संचालन पर प्रतिकूल प्रभाव पड़ता है।

प्रभाव स्तरः 5°C के तापमान में उतार-चढ़ाव के कारण प्रतिक्रिया दर में 10%~20% का परिवर्तन हो सकता है।

नियंत्रण के उपाय: प्रयोगशाला का तापमान 20 से 25 डिग्री सेल्सियस और सापेक्ष आर्द्रता 40% से 70% के बीच बनाए रखें; वातानुकूलन प्रणाली से यंत्रों पर सीधे हवा के प्रवाह से बचें;गर्मी स्रोतों और प्रत्यक्ष सूर्य के प्रकाश से दूर स्थान उपकरणों; इनक्यूबेटर का प्रयोग करें; कमरे के तापमान पर इनक्यूबेशन न करें।

7कंपन और विद्युत चुम्बकीय हस्तक्षेप

बाहरी कंपन ऑप्टिकल पथ की स्थिरता को प्रभावित कर सकते हैं, जिससे रीडिंग में उतार-चढ़ाव हो सकता है। मजबूत विद्युत चुम्बकीय हस्तक्षेप इलेक्ट्रॉनिक प्रणालियों के सामान्य संचालन को बाधित कर सकता है,जिसके परिणामस्वरूप डेटा में विसंगति होती हैउपकरण को एक मजबूत प्रयोगशाला बेंच पर रखा जाना चाहिए, कंपन के स्रोतों जैसे सेंट्रीफ्यूज या ऑसिलेटर से दूर, साथ ही साथ मजबूत विद्युत चुम्बकीय उपकरणों से।

प्रभाव स्तरः कंपन से रीडिंग में उतार-चढ़ाव हो सकता है और दोहराव में कमी आ सकती है।

परिचालन सावधानी: उपकरण को स्थिर, समतल प्रयोगशाला बेंच पर रखें; इसे कंपन स्रोतों और मजबूत विद्युत चुम्बकीय उपकरणों से दूर रखें।बिजली आपूर्ति हस्तक्षेप को कम करने के लिए एक पावर एडाप्टर का उपयोग करेंयदि आवश्यक हो, तो एक विनियमित बिजली की आपूर्ति का उपयोग करें।

V. मानक वक्र फिटिंग मोड चयन गाइड

MY-628 एंजाइम-लिंक्ड इम्यूनोसॉर्बेंट टेस्ट रीडर में आठ अंतर्निहित गणना मोड हैं; विभिन्न डिटेक्शन टेस्ट के लिए,सबसे सटीक एकाग्रता गणना परिणाम प्राप्त करने के लिए परीक्षण के खुराक-प्रतिक्रिया वक्र की विशेषताओं के आधार पर उपयुक्त फिटिंग मोड का चयन किया जाना चाहिए।.

चयन सिद्धांत:

1. किट के निर्देश पुस्तिका में अनुशंसित फिटिंग मोड को प्राथमिकता दें।
2. यदि कोई सिफारिश उपलब्ध नहीं है, तो मानक वक्र के आकार के आधार पर उपयुक्त विधि का चयन करें: रैखिक वक्र के लिए, "रैखिक" चुनें; एस के आकार की वक्र के लिए,"लॉगरिथमिक" या "अब्सॉर्बेंस प्रतिशत ️ लॉगरिदमिक एकाग्रता" चुनें; जटिल वक्रों के लिए, "क्यूबिक" या "स्पलाइन" चुनें.
3. न्यूनतम पुनर्मूल्यांकन विचलन के साथ मोड निर्धारित करने के लिए मानक संदर्भ सामग्री का उपयोग करके सत्यापन किया जाना चाहिए।
4. मात्रात्मक परिणाम मानक वक्र की सीमा के भीतर होना चाहिए; यदि कोई परिणाम इस सीमा के बाहर आता है, तो नमूना पतला किया जाना चाहिए और पुनः विश्लेषण किया जाना चाहिए।